Мы в Instagram

Лаборатория иммунологии и клеточной биотехнологии

Сотрудники нашей лаборатории в совершенстве владеют следующими методами исследования:

Культуральные методы:
1. получение и контроль качества биомедицинских клеточных продуктов персонифицированного применения;
2. культивирование перевиваемых монослойных и суспензионных линий клеток;
3. получение первичных культур клеток крови: дендритных клеток, макрофагов, Т-клеток и др.;
4. генерация толерогенных дендритных клеток;
5. наращивание биомассы гемопоэтических стволовых клеток пуповинной крови и костного мозга;
6. криоконсервация и хранение клеток человека и животных;
7. получение мезенхимальных стволовых клеток костного мозга, жировой ткани и обонятельного эпителия человека;
8. получение фибробластов и кератиноцитов кожи, клеток-предшественников кератиноцитов и др. клеток мезенхимального происхождения;
9. смешанная культура клеток;
10. клоногенный тест (исследование дифференцировочного потенциала гемопоэтических стволовых клеток);
11. исследование дифференцировочного потенциала мезенхимальных стволовых клеток (остеогенная, адипогенная, нейрогенная, кардиогенная, миогенная, хондрогенная дифференцировка).
Выделение (изоляция) клеток:
1. методом адгезии (моноциты крови, мезенхимальные клетки);
2. на линейных и нелинейных градиентах плотности (мононуклеарные клетки, нейтрофилы, моноциты);
3. прямая и непрямая иммуномагнитная сепарация;
4. выделение клеток на автоматических сортерах.
Иммунологические методы:
1. проточная цитофлюориметрия: исследования любого уровня сложности;
2. определение широкого спектра поверхностных и внутриклеточных молекул на различных клетках (лимфоциты, моноциты, дендритные клетки, базофилы, нейтрофилы, эндотелиоциты, миелоидные супрессорные клетки, истощенные Т-клетки, ретикулоциты, мезенхимальные и гемопоэтические стволовые клетки, клетки, выделенные из лимфоцидных органов человека и животных и др.) методом проточной цитометрии;
3. флуоресцентная микроскопия для визуализации структур клеток;
4. определение стадий клеточного цикла с использованием интеркалирующих красителей (PI, DAPI, 7-AAD);
5. определение антигенспецифических Т-клеток;
6. определение жизнеспособности клеток: а) рутинными методами исключения красителя (трипановый синий), б) при помощи проточного цитометра с использованием интеркалирующих флуорохромов (PI, 7-AAD, ToTo, ToPro и др.), в) с использованием красителей, флуоресцирующих под действием внутриклеточных эстераз (FDA);
7. исследование апоптоза: а) при помощи определения фосфатидилсерина мембран аннексином V и б) определением экспрессии внутриклеточных каспаз;
8. определение пролиферации: а) на проточном цитометре с использованием бромодезоксиуридина (BrDU) и CFSE, б) колориметрическими методами с применением MTT и аламара синего;
9. исследование продукции свободных радикалов кислорода и оксида азота с использованием DCFDA, DHR123, HE и других зондов;
10. исследование фагоцитоза: а) рутинными методами (убитые микроорганизмы, латекс, зимозан), б) на проточном цитометре с использованием флуоресцентно-меченных микроорганизмов;
11. определение мембранного потенциала клеток с применением зонда MC540;
12. иммуноферментный анализ;
13. определение концентрации иммуноглобулинов крови.
Кариологические методы:
оценка стабильности кариотипа с окраской хромосом красителем Hoechst.
Молекулярная биология:
1. базовые методы: выделение ДНК и РНК из сыворотки крови и клеток, обратная транскрипция и др.;
2. ПЦР с детекцией в режиме реального времени для определения экспрессии генов;
3. дизайн ДНК-биочипов, гибридизация и обработка результатов;
4. определение видовой принадлежности и кросс-контаминации культур клеток человека и животных методом мультиплексной ПЦР;
5. определение метилированных участков клеточной ДНК (BlsI и GlaI ПЦР-анализ) и анализа уровня онкогенности клеток.
Иммунофлюоресценция (прямая и непрямая):
1. выявление антинуклеарных (АНА) и антинейтрофильных (АНЦА) антител в сыворотке крови при помощи субстратных слайдов;
2. экспрессия молекул на поверхности гемопоэтических клеток методом РИФ;
3. витальное окрашивание клеток.
Другое:
1. получение лизатов опухолевых клеток, стандартизация и контроль качества;
2. определение концентрации белка;
3. контроль стерильности;
4. определение биологической активности Г-КСФ.
Статистические методы:
Методы параметрической и непараметрической статистики, кластерный, дисперсионный анализ, логистическая регрессия, ROC-анализ и другое.

Использование материалов сайта возможно исключительно с письменного разрешения авторов. При цитировании обязательна ссылка на сайт.